細胞培養是生物科研基礎核心操作，新手常因細節疏漏導致細胞污染、狀態異常，不僅浪費樣本與時間，更會影響后續實驗進度。結合實操經驗，梳理新手高頻踩坑點及規避方法，幫大家快速建立規范操作邏輯，保障細胞培養穩定性。

無菌操作：細節失守=污染高發，這些誤區別踩

無菌環境是細胞培養的核心前提，新手常因操作不規范引發細菌、真菌、支原體污染，多數問題源于細節疏忽：

1. 超凈臺使用：開機后需紫外線消毒30分鐘以上，消毒后等待紫外線關閉、通風片刻再操作，避免紫外線殘留損傷細胞；操作時手臂需在超凈臺內指定區域活動，避免跨越無菌區，實驗用品擺放有序，不堆積雜物遮擋氣流，同時保持超凈臺內定期清潔，及時清理廢液與殘留試劑。

2. 實驗操作規范：接種、傳代、換液時，試劑瓶口、培養瓶瓶口需經酒精燈外焰滅菌，滅菌后避免瓶口接觸非無菌表面（如桌面、手套外側）；吸液時使用一次性移液槍頭，不同試劑、不同細胞的槍頭不可混用，避免交叉污染；胰酶消化細胞時，需根據細胞類型控制消化時間，觀察到細胞間隙變大、貼壁松動即可終止消化，避免消化過度損傷細胞膜。

3. 環境與人員防護：操作時穿戴無菌手套、口罩、實驗服，手套破損后及時更換；實驗室定期通風、滅菌，避免與微生物實驗區域交叉使用；細胞培養箱需定期清潔消毒，控制好溫度、濕度與CO?濃度，定期檢查水箱水質，避免水箱污染引發培養環境變質。