大腸桿菌（Escherichia coli），又叫大腸埃希氏菌，是動物腸道中的正常寄居菌。大腸桿菌中的小部分是條件致病菌，在一定條件下可以引起人和多種動物發生胃腸道感染或尿道等多種局部組織器官感染，還會引起關節炎、腦膜炎以及敗血型感染等。

大腸菌群指的是需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。

大腸桿菌與大腸菌群常被用作檢驗水質的指示菌。大腸桿菌隨糞便排出體外；大腸菌群不僅生活在人的腸道，也生活在土壤和地表水中。因此，將大腸桿菌與大腸菌群共同作為指示菌，既可以評價水樣中的糞便污染程度，也可以評價水在凈化、儲存、運輸等環節中存在的安全問題。

我國《生活飲用水標準》（GB/T 5750.12-2006）、《畜禽飲用水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定 酶底物法》（NY/T 1665-2008）提出了使用酶底物法檢測水質中的總大腸菌群和大腸埃希氏菌，并提到“可選用市售商品化制品，以此計數來檢測水中總大腸菌群”。

《標準 地表水和廢水中大腸桿菌和大腸桿菌類細菌的檢測與計數》 （ISO9308-1.2014）采用的是濾膜法聯合CCA顯色培養基法，用于水中大腸桿菌和大腸菌群的計數。該方法得出結果的時間更短，而且無須額外的培養基進行驗證試驗。但是，該方法適合菌落數小于100的水樣，如：飲用水、自來水、消毒的池水，并不適用于地表水和井水。

據ISO資料顯示：CCA培養基的靈敏度為94%（大腸桿菌）和91%（大腸菌群），特異性為97%（大腸桿菌）和94%（大腸菌群），性能較好。而HiMedia公司提供的新一款CCA顯色培養基，批間差異極小，批次結果穩定，重復性和準確度進一步提升。

Himedia公司生產的CCA顯色培養基（貨號：M1991AI，品名：HiChrome™ Chromogenic Coliform Ager w/1%Agar）推薦用于檢測水樣和臨床樣本中的大腸桿菌和大腸菌群（如水、污水、尿液等）。該培養基成分和性能符合ISO 9308-1:2014標準。

本品為選擇性培養基，在M1991I的基礎上做了改進，可從水樣中同時檢測大腸桿菌和大腸菌群（1）。其中，胰蛋白胨、丙酮酸鈉和山梨醇為生物體提供氮源物質、可發酵的碳水化合物和其他必需的生長營養素。磷酸鹽提供緩沖能力。該培養基配方甚至可以幫助半致死受傷的大腸菌群恢復并迅速生長。Tergitol-7抑制革蘭氏陽性菌和某些大腸菌群之外的革蘭氏陰性菌。

M1991AI含有三種顯色底物。大腸菌群產生的ß-D-半乳糖苷酶裂解6-氯-3-吲哚氧基-β-D-吡喃半乳糖苷，產生粉紅色菌落。大腸桿菌產生的β-D葡萄糖醛酸酶裂解5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖醛酸環己胺銨鹽（2）。大腸桿菌為β-半乳糖苷酶和β-D葡萄糖醛酸酶雙陽性，因而菌落呈深藍至紫色（圖1）。第三種顯色原IPTG用于增強顯色反應。

圖1. HiCrome^TM CCA顯色培養基，大腸桿菌呈深藍至紫色，大腸菌群呈粉紅色

該培養基接種時可采用平板傾注或表面涂布技術。也可采用薄膜過濾法。要確證大腸桿菌，可在深藍色至紫色菌落上加入一滴Kovacs試劑，出現櫻桃紅的顏色表明為陽性反應。

參考文獻                                   

1. Jorgensen, J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.

2.International Organization for Standardization. Water quality: Enumeration of E.coli and coliform bacteria. Part I-Membrane filtration methods for bacteria with low bacterial background flora. ISO 9308-1:2014.

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